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冀百康生物「重組III型人源化膠原蛋白」已獲專利并成功完成Ⅱ類醫(yī)療器械主文檔登記
新聞中心 產(chǎn)品推薦 全新打造的耐“熱”重組胰蛋白酶,助力您的科研成果!
全新打造的耐“熱”重組胰蛋白酶,助力您的科研成果!
2024/08/30

胰蛋白酶大致可以分為兩種,一種是傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶,主要提取自牛或豬的胰腺組織,其缺點是可能會帶來病毒污染的風險;另一種則是非動物源性胰酶,即利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。


胰蛋白酶 :早期的胰蛋白酶在生物制藥的主要應用是胰島素的生產(chǎn),不過很快也在其他領(lǐng)域發(fā)光發(fā)熱。動物源的胰蛋白酶具有極大的潛在風險,其自身可能攜帶大量可感染人的病毒, 例如:瘋牛病的牛帶有的BSE病毒,豬的口蹄疫病毒,可在人和動物之間傳播的禽類的流感病毒等。


重組胰蛋白酶 :重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的酶。在整個生產(chǎn)流程中,嚴格避免了使用任何動物源性原材料,解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風險,確保了重組胰蛋白酶產(chǎn)品的安全性、高純度及超高比活等特性。是生物藥及科研領(lǐng)域不可缺少的工具酶。



重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶


冀百康生物全新推出的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶,是通過畢赤酵母的表達系統(tǒng),經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、分離純化,再經(jīng)冷凍干燥得到的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶粉末。不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑,具有與天然胰蛋白酶相同的活性和特異性。與重組豬胰蛋白酶等不同,該重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶不易自切,配制為細胞消化液后可在2-8℃穩(wěn)定存放30天,可完美規(guī)避在使用重組胰蛋白酶過程中反復凍融而造成的損耗。TrypRE select(1×)(重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶消化液)更是可在2-8℃條件下可保存24個月。


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產(chǎn)品優(yōu)勢:


1、不易自切,穩(wěn)定性較高;


2、避免反復凍融造成的損耗;


3、對細胞作用溫和:細胞毒性小,可保持細胞健康;


4、合規(guī)性:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,符合GMP指導原則。


科普 —— “不易自切”

不易自切是指重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶在催化蛋白質(zhì)水解反應過程中,相較于傳統(tǒng)胰蛋白酶,不容易發(fā)生自我水解作用,從而避免了自身蛋白分子的快速降解。這種特性使得重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶在保持酶活力和穩(wěn)定性方面具有顯著優(yōu)勢,尤其是在長時間儲存和反復凍融過程中,能夠最大程度地減少酶活性的損失。



與常見酶液對比


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重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶在細胞培養(yǎng)中的應用


在細胞培養(yǎng)過程中,重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶的高比活性能顯著提高細胞消化的效率。使用重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶對貼壁細胞進行處理,能夠快速水解細胞間的沾粘蛋白,釋放出單個獨立細胞。與此同時,重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶不易自切的特性,使得其在細胞消化過程中能更溫和地作用,降低對細胞造成的傷害,有效避免外源性病毒和內(nèi)毒素的污染,從而不會影響細胞傳代,保持了高細胞活力和細胞產(chǎn)量。


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*細胞傳代示意圖

(來源:醫(yī)健速知《細胞傳代詳細步驟》)



推薦在實際應用中的使用步驟:

1)使用前將TrypRE select(1×)和完全生長培養(yǎng)基預熱至37℃。隨后,吸出并丟棄用過的培養(yǎng)基;

2)用5ml不含Ca2+和Mg2+的DPBS緩沖液清洗細胞,隨后吸出并丟棄;

3)加入適量體積TrypRE select(1×)到培養(yǎng)瓶,確保TrypRE select(1×)完全覆蓋細胞;

4)在37℃下孵育,直至細胞脫落。使用倒置顯微鏡觀察細胞,以確保細胞從培養(yǎng)瓶表面完全脫落;

5)加入5-10ml預熱的完全培養(yǎng)基到培養(yǎng)瓶,傾斜培養(yǎng)瓶直到徹底沖洗培養(yǎng)瓶,將細胞懸液轉(zhuǎn)移至15ml錐形管中,100×g離心5-10min;

6)丟棄上清液,并用2-5ml預熱的完全培養(yǎng)基重懸細胞沉淀;

7)根據(jù)您的細胞類型,根據(jù)正常方案接種、孵育和繼代培養(yǎng)。



重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶有許多潛在用途,包括用于生物藥物生產(chǎn),如胰島素等。重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風險是生物藥及科研領(lǐng)域是不可缺少的工具酶。



產(chǎn)品參數(shù)


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訂購規(guī)格


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珠海冀百康生物科技有限公司成立于2015年,擁有前沿的合成生物學創(chuàng)新技術(shù),專注于“高活性生物原料”與“高端生物制藥”兩大核心領(lǐng)域。產(chǎn)品主要應用在抗體、疫苗、蛋白類、核酸類藥物的生產(chǎn)以及細胞培養(yǎng)、人造肉、功效護膚和醫(yī)美領(lǐng)域。冀百康生物擁有4000多㎡符合國際GMP標準的生產(chǎn)車間, 超2噸的生物發(fā)酵罐;行業(yè)的競爭力主要體現(xiàn)在:研發(fā)創(chuàng)新能力強,客戶服務(wù)系統(tǒng)完善,給品牌客戶提供完整的解決方案及CDMO/ODM服務(wù)。



參考文獻:

1、知網(wǎng) [1]楊霽菡.胰蛋白酶自切規(guī)律的解析及抗自切改造[D].天津科技大學,2016.DOI:10.27359/d.cnki.gtqgu.2016.000036

2、來源:冷春生, 崔航, 李淑楠 . 重組酶在胰島素生產(chǎn)中的應用[J]. 中國藥學(英文版), 2014, 23(5): 335-337.


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